業(yè)內(nèi)動(dòng)態(tài)
常見的口蹄疫病毒診斷檢測技術(shù)
發(fā)布時(shí)間：2020-05-09 10:56:10
口蹄疫病毒
口蹄疫病毒(FootandMouthDiseaseVirus，F(xiàn)MDV)屬于小RNA病毒科，口蹄疫病毒屬。口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)感染引起的偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、接觸性傳染病，最易感染的動(dòng)物是黃牛、水牛、豬、駱駝、羊、鹿等;黃羊、麝、野豬、野牛等野生動(dòng)物也易感染此病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報(bào)告動(dòng)物傳染病之一，我國也將FMD列為一類動(dòng)物疫病。
我國《2019年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》中強(qiáng)調(diào)要對口蹄疫高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)云南、廣西、貴州、廣東和新疆；重點(diǎn)省份河北、河南、湖北、湖南、江蘇、福建、浙江、安徽、江西、四川、山西、陜西等12省份的豬、牛、羊進(jìn)行重點(diǎn)監(jiān)測。
病原流行特點(diǎn)
口蹄疫病毒目前有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3(即南非1、2、3型)和Asia1(亞洲1型)7個(gè)血清型。各型之間幾乎沒有免疫保護(hù)力，感染了一型口蹄疫的動(dòng)物仍可感染另一型口蹄疫病毒而發(fā)病?？谔阋咴趤喼?、非洲和中東以及南美均有流行，在非流行區(qū)也有散發(fā)病例。診斷口蹄疫可以根據(jù)臨床癥狀、病理變化、血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測結(jié)果。
檢測標(biāo)準(zhǔn)
口蹄疫檢測標(biāo)準(zhǔn)（現(xiàn)行）
臨床癥狀
易感動(dòng)物臥地不起或跛行，?？梢姶袅⒘飨?。
易感動(dòng)物唇部、舌面、齒齦、鼻鏡、蹄踵、蹄叉、乳房等部分出現(xiàn)水泡。
發(fā)病后期，水泡破潰、結(jié)痂，嚴(yán)重者蹄殼脫落，恢復(fù)期可見瘢痕、新生蹄甲。
傳播速度快，發(fā)病率高；成年動(dòng)物死亡率低，幼畜常突然死亡且死亡率高，仔豬場成窩死亡。
實(shí)驗(yàn)室檢測診斷
口蹄疫診斷檢測技術(shù)正在不斷地改進(jìn)和創(chuàng)新，已從細(xì)胞培養(yǎng)、血清學(xué)診斷技術(shù)領(lǐng)域擴(kuò)展到了分子生物學(xué)診斷技術(shù)領(lǐng)域。這些新技術(shù)不僅敏感、特異，而且還簡便、快速、高通量化。 今天我們就主要介紹兩種常用的檢測技術(shù)。 （一）病原檢測-熒光熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 熒光實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)就是通過對聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增反應(yīng)中的每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實(shí)時(shí)檢測從而實(shí)現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析。在其反應(yīng)中引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)反應(yīng)的進(jìn)行，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的，從而得到熒光擴(kuò)增曲線圖。相比常規(guī)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)，熒光實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的特異性強(qiáng)，靈敏度高，可直接對產(chǎn)物進(jìn)行定量，自動(dòng)化程度高，操作簡單，亦解決聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)污染問題。目前已得到廣泛應(yīng)用。
（二）抗體檢測-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的基礎(chǔ)是抗原的固相化及抗體的酶標(biāo)記。ELISA方法是抗體檢測最常用方法之一，該方法具有操作簡單、快速、敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可用于疫苗免疫抗體的檢測。其中非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體間接/阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)還可特異性鑒別檢測口蹄疫病毒野毒感染情況。
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